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產(chǎn)品名稱: AH109菌株
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品展商: XYbscience
產(chǎn)品文檔: 無相關(guān)文檔
簡單介紹
AH109菌株來源于PJ69-2A 酵母菌株，將lacZ報告基因引入PJ69-2A誕生了AH109，此菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒或與MATα型酵母菌株Y187通過mating操作進(jìn)行蛋白互作驗證或篩庫試驗。AH109菌株Transformation marker為: trp1, leu2，報告基因為：lacZ, HIS3, ADE2, MEL1。AH109 -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為TRP1，用于表達(dá)DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白；
AH109菌株
的詳細(xì)介紹
AH109菌株
產(chǎn)品信息：
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貨號
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名稱
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產(chǎn)品形式
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規(guī)格
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儲存
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XY1519
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AH109 Strain
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100μl
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-20℃
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使用說明：
信裕質(zhì)粒平臺的各批次質(zhì)粒菌株發(fā)貨前均經(jīng)過嚴(yán)格的多重驗證，如存在質(zhì)量問題，請在收到產(chǎn)品三個月內(nèi)通知我司。收到甘油菌后，請及時在固體平板上劃線培養(yǎng)，挑取單菌落接種到液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)后使用并保存甘油菌。如需獲取其他詳細(xì)信息請登錄我司官網(wǎng)聯(lián)系QQ客服查詢。
基因型：
MATa,trp1-901,leu2-3,112,ura3-52,his3-200,gal4Δ,gal80Δ,LYS2::GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3,MEL1GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2,URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ
基本信息：
培養(yǎng)基：YPDA
菌株類別：酵母菌
培養(yǎng)條件：28℃，有氧，YPDA
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化：電轉(zhuǎn)
保存方式：30%甘油，-20℃
基本應(yīng)用：酵母雙雜交
菌株簡介：
AH109菌株來源于PJ69-2A 酵母菌株，將lacZ報告基因引入PJ69-2A誕生了AH109，此菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?；蚺cMATα型酵母菌株Y187通過mating操作進(jìn)行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker為: trp1, leu2，報告基因為：lacZ, HIS3, ADE2, MEL1。AH109 -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為TRP1，用于表達(dá)DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒PGADT7的篩選標(biāo)志為LEU，用于表達(dá)AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標(biāo)蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4系統(tǒng)原理：一個完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨立的兩個結(jié)構(gòu)域：位于N端1 ~ 174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域（DNA-BD）和位于C端768 ~881 位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并與之結(jié)合。而AD可以啟動UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨存在不能激活轉(zhuǎn)錄，但當(dāng)二者接近時，則呈現(xiàn)完整的GAL4活性，使含有UAS的啟動子下游基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。正常條件下，BD不與AD結(jié)合，將要檢測的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合，形成 bait 融合蛋白（bait -BD）和 prey 融合蛋白（prey-AD），如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用，就會促使 BD 和 AD 的相互接近，形成完整的GAL4，從而激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。AH109有四個報告基因：lacZ, HIS3, ADE2, MEL1，分別由三種不同的啟動子（GAL1，GAL2，MEL1）啟動，這三種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區(qū)相同，其余部分均不同，大大降低了酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。
注意事項：
1、為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。本產(chǎn)品僅可用于實驗室研究，不能用于動物，人體以及作為食品添加劑等用途。
2、使用本產(chǎn)品的甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可，也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，菌株的活力會逐漸下降。