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產(chǎn)品名稱: NMY51菌株
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品展商: XYbscience
產(chǎn)品文檔: 無(wú)相關(guān)文檔
簡(jiǎn)單介紹
NMY51菌株Transformation marker為: trp1, leu2-3,報(bào)告基因?yàn)椋篐IS3, ADE2 和 lacZ,**步通過營(yíng)養(yǎng)缺陷型報(bào)告基因(HIS3, ADE2)進(jìn)行選擇性生長(zhǎng)篩選,進(jìn)一步通過 LacZ 報(bào)告基因進(jìn)行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選,三個(gè)獨(dú)立的報(bào)告基因,受不同啟動(dòng)子的調(diào)控,降低假陽(yáng)性幾率。NMY51菌株原理:泛素(ubiquitin)分子量很小,由 76aa 殘基組成;泛素作為降解信號(hào)分子,可以連接另外一種蛋白質(zhì)的 N 端,然后被泛素專一性蛋白酶(UBPs)識(shí)別,從而導(dǎo)致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分:N 端(Nub),C 端(Cub)。首先,人為地將泛素 Nub 的 3 位異亮氨酸突變?yōu)楦拾彼幔∟ubI 突變?yōu)?NubG)。
NMY51菌株
的詳細(xì)介紹
NMY51菌株
產(chǎn)品信息:
貨號(hào)
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名稱
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產(chǎn)品形式
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規(guī)格
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儲(chǔ)存
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NMY51 Strain
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100μl
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-20℃
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使用說明:
信裕質(zhì)粒平臺(tái)的各批次質(zhì)粒菌株發(fā)貨前均經(jīng)過嚴(yán)格的多重驗(yàn)證,如存在質(zhì)量問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品三個(gè)月內(nèi)通知我司。收到甘油菌后,請(qǐng)及時(shí)在固體平板上劃線培養(yǎng),挑取單菌落接種到液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)后使用并保存甘油菌。如需獲取其他詳細(xì)信息請(qǐng)登錄我司官網(wǎng)聯(lián)系QQ客服查詢。
基因型:
MATahis3Δ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4
基本信息:
培養(yǎng)基:YPDA
菌株類別:酵母菌
培養(yǎng)條件:28℃,有氧,YPDA
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化:電轉(zhuǎn)
保存方式:30%甘油,-20℃
基本應(yīng)用:酵母雙雜交
菌株簡(jiǎn)介:
DUALmembrane系統(tǒng)是公司開發(fā)的專門篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測(cè)技術(shù),它利用分離的泛素系統(tǒng)(split-ubiquitin)直接檢測(cè)天然狀態(tài)下膜蛋白間的相互作用,是目前市面上**檢測(cè)膜蛋白間相互作用的酵母雙雜系統(tǒng)。此系統(tǒng)采用NMY51酵母菌株,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn);此菌株Transformation marker為: trp1, leu2-3,報(bào)告基因?yàn)椋篐IS3, ADE2 和 lacZ,**步通過營(yíng)養(yǎng)缺陷型報(bào)告基因(HIS3, ADE2)進(jìn)行選擇性生長(zhǎng)篩選,進(jìn)一步通過 LacZ 報(bào)告基因進(jìn)行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選,三個(gè)獨(dú)立的報(bào)告基因,受不同啟動(dòng)子的調(diào)控,降低假陽(yáng)性幾率。原理:泛素(ubiquitin)分子量很小,由 76aa 殘基組成;泛素作為降解信號(hào)分子,可以連接另外一種蛋白質(zhì)的 N 端,然后被泛素專一性蛋白酶(UBPs)識(shí)別,從而導(dǎo)致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分:N 端(Nub),C 端(Cub)。首先,人為地將泛素 Nub 的 3 位異亮氨酸突變?yōu)楦拾彼幔∟ubI 突變?yōu)?NubG)。這樣與 Cub 的親合力大大降低,避免了 Cub 和 Nub 自我結(jié)合或接近的可能性。其次,將Cub 部分與人工合成的 LexA-VP16 轉(zhuǎn)錄激活因子融合成一個(gè)融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常條件下 NubG不與Cub 結(jié)合,UBPs 也不能識(shí)別分離的泛素,轉(zhuǎn)錄激活因子也不會(huì)被切下來(lái)。*后,將要檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與NubG和Cub融合,形成 bait 融合蛋(bait-cub-LexA -VP16)和 prey 融合蛋白(prey-NubG)。如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用,就會(huì)促使 NubG 和 Cub 的相互接近,被 UBPs 識(shí)別,導(dǎo)致 LexA-VP16 的解離,進(jìn)入核內(nèi),從而激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。 此系統(tǒng)可使用四種Bait質(zhì)粒:pBT3-N,pBT3-SUC,pBT3-STE,pBT3-C,篩選標(biāo)志均為L(zhǎng)EU;三種Prey質(zhì)粒:pPR3-C ,pPR3-SUC,pPR3-STE,篩選標(biāo)志均為TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),然后使用30%的甘油保藏菌種。
注意事項(xiàng):
1、為了您的**和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究,不能用于動(dòng)物,人體以及作為食品添加劑等用途。
2、使用本產(chǎn)品的甘油菌時(shí)可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可,也可以完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,菌株的活力會(huì)逐漸下降。