豬瘟抗體試劑盒
產(chǎn)品介紹
【產(chǎn)品名稱】
通用名：豬瘟病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)**法）
英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Classical Swine fever virus (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96T/盒
豬瘟抗體試劑盒【預(yù)期用途】
本試劑盒用于檢測(cè)豬血清中豬瘟病毒IgG抗體，評(píng)估豬場(chǎng)豬瘟疫苗**狀況。
【原 理】
本試劑盒系由預(yù)包被豬瘟病毒E2重組蛋白的微孔板和酶標(biāo)記二抗及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)**法（ELISA）原理檢測(cè)豬血清或血漿中豬瘟病毒特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，在包被板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬瘟病毒的特異性抗體，則將與包被板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。
【試劑盒組成】
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1.
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豬瘟病毒抗原預(yù)包被微孔板條
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96T×1
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2.
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酶標(biāo)記物 (紅蓋)
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11ml×1
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3.
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樣品稀釋液 (藍(lán)蓋)
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25ml×1
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4.
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20X濃縮洗滌液 (白蓋)
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25ml×1
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5.
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底物液A (棕蓋)
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7ml×1
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6.
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底物液B (黑蓋)
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7ml×1
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7.
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終止液 (黃蓋)
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7ml×1
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8.
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陽(yáng)性對(duì)照 (藍(lán)蓋，已滅活)
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0.5ml×1
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9.
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陰性對(duì)照 (藍(lán)蓋，已滅活)
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0.5ml×1
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10.
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蓋板膜
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1張
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11.
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說(shuō)明書(shū)
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1份
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豬瘟抗體試劑盒【樣品制備】
取動(dòng)物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品短期可于2～8℃保存，長(zhǎng)期需置-20℃保存。
【樣品稀釋】
用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
豬瘟抗體試劑盒【洗滌液配制】
濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右），并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【試驗(yàn)操作方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽(yáng)性對(duì)照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣本100μl；空白對(duì)照孔不加。
4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A）。
豬瘟抗體試劑盒【結(jié)果判定】
定義：N=陰性對(duì)照孔平均A值；P=陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值；S=樣品孔A值；S/P=樣品孔A值/陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值。
1.正常情況下P/N≥2.1即試驗(yàn)成立；否則不成立。
2.S/P≥0.4時(shí)判為陽(yáng)性，S/P＜0.3時(shí)判為陰性，0.3≤S/P＜0.4時(shí)判為可疑。
當(dāng)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)表明豬抗體水平不足，建議補(bǔ)打相應(yīng)疫苗。
【試驗(yàn)方法的局限性】
該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬瘟病毒IgG抗體。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行**隔離制度，各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來(lái)水沖洗。
3.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開(kāi)袋，未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2～8℃避光
保存，使用期限為1個(gè)月)
4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶，使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以完全溶解。
5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號(hào)試劑組分不得混用。
【儲(chǔ) 存】
原包裝應(yīng)儲(chǔ)存于2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個(gè)月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號(hào)見(jiàn)外包裝。