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產(chǎn)品名稱(chēng): Anaerofilum medium
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品展商: TIANDZ
產(chǎn)品文檔: 無(wú)相關(guān)文檔
簡(jiǎn)單介紹
Anaerofilum medium生物緩沖物質(zhì)的質(zhì)量要求嚴(yán)格，如pKa值約在6~8之間；在水系中要有較好的溶解性，在有機(jī)溶劑中要有極小的溶解性；Anaerofilum medium對(duì)生物膜要較無(wú)滲透性；受濃度、溫度，以及介質(zhì)中離子的影響要極小；能與陽(yáng)離子形成可溶性絡(luò)合物；干燥或溶液狀態(tài)有極好的穩(wěn)定性等。
Anaerofilum medium
的詳細(xì)介紹
DNA提取 ：一、Anaerofilum medium實(shí)驗(yàn)原理
DNA是遺傳信息的載體，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中*重要、*基本的操作之一。我公司提供從各種不同來(lái)源的樣品（如**、**、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、細(xì)胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化銨）是一種陽(yáng)離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，Anaerofilum medium通過(guò)有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類(lèi)等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來(lái)。此法多用于植物組織、**等材料。
● SDS法 SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、**、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及檢測(cè)
● Anaerofilum medium瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度 DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測(cè)DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說(shuō)明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說(shuō)明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
三、Anaerofilum medium樣品處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——?jiǎng)驖{、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
Anaerofilum medium注意：客戶(hù)*好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
250mgXY130876PreScissiom 蛋白酶100UXY130872SUMO 蛋白酶5μgXY130875葡激酶100μgXY131183鏈激酶100μgXY130873TEV蛋白酶300UXY120708凝血酶1000UXY131028嗜熱菌蛋白酶25mgXY131029胰蛋白酶，質(zhì)譜級(jí)100μgXY130868人二硫鍵異構(gòu)酶1mgXY130869人超氧化物歧化酶10kuXY120623β-瓊脂糖酶Ⅰ100U|500UXY100406溶菌酶干粉10gXY100815溶菌酶溶液1.5mLXY131017乙?；Ｑ灏椎鞍?00μLXY130874人玻連蛋白100μgXY130870硫氧還蛋白5mgXY131021鏈霉親和素1mgXY130818HRP標(biāo)記鏈霉親和素0.1mLXY131022堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素0.5mLXY131085親和素10mgXY131086HRP標(biāo)記親和素2mgXY131087堿性磷酸酶標(biāo)記親和素100mgXY131088熒光素(FITC)標(biāo)記親和素5mgXY131090中性親和素蛋白10mgXY131092生物素1gXY131093熒光素標(biāo)記的生物素5mgXY131094生物素化的牛血清白蛋白25mgXY131095生物素化的辣根過(guò)氧化物酶5mgXY131096生物素化的堿性磷酸酶(AP)1mgXY131098生物素化蛋白G0.5mgXY131099生物素化蛋白A1mgXY131101生物素化蛋白L0.5mgXY131102生物素化兔IgG5mgXY130661RecA蛋白200μg|1000μgXY130662Tth RecA 蛋白100μgXY130663T4 噬菌體基因 32 蛋白100μg|500μgXY130664極高熱穩(wěn)定單鏈結(jié)合蛋白50μg
核酸電泳及回收