柱式糞便RNAout
柱式糞便RNAout低于1.7,考慮RNA降解,*常見的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來不及也可以買現(xiàn)成的。
2.提取時注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時間不宜過長(一般不超過一個月)。
柱式糞便RNAout提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過程應該盡量快,不要太過仔細,以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時要小心,離心管盡量不要抖動和傾斜,保持其從離心機里拿出來的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.柱式糞便RNAout干燥時不要太過
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個結(jié)果不是很準確,因為在跑膠的過程當中RNA也會降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,柱式糞便RNAout然后用管家基因檢測,只要能擴出明亮的條帶即對你的實驗沒有影響。注意:在用管家基因檢測時應增加循環(huán)數(shù),以檢測是否有DNA污染。
XY90404 柱式植物RNAOUT 2.0 50次 XY80903 大提柱式植物RNAOUT 5次 XY120503 柱式藻類RNAOUT 50次 XY90704 土壤RNAOUT 50次 XY90705 柱式土壤RNAOUT 50次 XY60305 **RNAOUT 50次|250次 XY80804 柱式**RNAOUT 50次 XY80904 大提柱式**RNAOUT 5次 XY51102 **RNAOUT 100次|250次 XY80103 柱式**RNAOUT 50次 XY80905 大提柱式**RNAOUT 5次 XY3073 一管式病毒RNAOUT 50次|200次 XY71001 柱式病毒RNAOUT 50次 XY80922 96孔板病毒RNAOUT(離心法) 1次|5次 XY80104 一站式柱式miRNAOUT 50次 XY80906 一站式大提柱式miRNAOUT 5次