大提柱式動(dòng)物RNAout
大提柱式動(dòng)物RNAout低于1.7,考慮RNA降解,*常見(jiàn)的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來(lái)不及也可以買(mǎi)現(xiàn)成的。
2.提取時(shí)注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(一般不超過(guò)一個(gè)月)。
大提柱式動(dòng)物RNAout提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過(guò)程應(yīng)該盡量快,不要太過(guò)仔細(xì),以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時(shí)要小心,離心管盡量不要抖動(dòng)和傾斜,保持其從離心機(jī)里拿出來(lái)的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.大提柱式動(dòng)物RNAout干燥時(shí)不要太過(guò)
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個(gè)結(jié)果不是很準(zhǔn)確,因?yàn)樵谂苣z的過(guò)程當(dāng)中RNA也會(huì)降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來(lái)的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,大提柱式動(dòng)物RNAout然后用管家基因檢測(cè),只要能擴(kuò)出明亮的條帶即對(duì)你的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響。注意:在用管家基因檢測(cè)時(shí)應(yīng)增加循環(huán)數(shù),以檢測(cè)是否有DNA污染。
XY8130501 柱式內(nèi)****劑 1.5mL
XY8130419 內(nèi)****專(zhuān)用親和介質(zhì) 5mL|50mL
XY8120415 終點(diǎn)顯色法內(nèi)**定量試劑盒 32次
XY8130504 凝膠法內(nèi)**半定量試劑盒 10×0.1mL
XY851203 非酶RNA**劑1.0 1.5mL
XY860912 非酶RNA**劑2.0 1.5mL
XY860801 柱式腐殖酸**劑 30次|100次
XY8111008 非酶多糖**劑(DNA專(zhuān)用) 50次
XY860804 PCR抑制物**劑 1mL
XY860911 硅膠膜離心吸附柱系列(小提) 50套
XY890303 硅膠膜DNA離心吸附柱(大提) 1套
XY860606 硅膠膜離心吸附柱再生液 500次
XY8100307 酸洗玻璃珠系列 10g
XY8130514 硅基磁珠 2mL
XY8130515 氨基磁珠 2mL
XY8130516 羧基磁珠 2mL
XY8130517 環(huán)氧基磁珠 2mL
XY8130518 醛基磁珠 2mL